布氏杆菌病是怎样一种病？如何检测？

布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的一种人畜共患的慢性传染病。传染途径是病牛或带菌牛，特别是在流产或分娩时，大量布氏杆菌随胎儿、胎水和胎衣排出，偶尔在乳、粪、尿以及阴道流出的恶露内发现。然后通过消化道、损伤或完整的皮肤、黏膜、结膜和交配而互相感染。病牛的临床特点是发生流产、胎衣滞留、子宫炎、不孕症、乳房炎、关节炎等，孕牛在7～8月时流产。公牛发生睾丸炎和附睾炎。人可通过与病牛的频繁接触及食入未严格杀菌的病牛乳、肉而感染。人患病的主要症状是呈波浪热、关节炎和睾丸肿胀，头和全身疼痛，有的发生骨质变形、流产等。

布氏杆菌的检验主要是采用两种血清学诊断方法：

（1）虎红平板凝集反应。采被检血清0.03毫升，加抗原0.03毫升与之混合，4分钟内观察反应并判定结果。凝集者判为阳性，不凝者判为阴性。对阳性反应的牛再进行试管凝集反应。

（2）试管凝集反应。操作方法：每份血清用5支小试管，第一管加入2.3毫升0.5%碳酸生理盐水；第二管不加；第三、第四、第五管各加入0.5毫升。用1毫升吸管吸取被检血清0.2毫升加入第一管内并混匀之，以该吸管吸取混合液分别加入第二管和第三管，每管0.5毫升。以该吸管将第三管混合液混匀，吸取0.5毫升加入第四管，混匀后，再从第四管吸取0.5毫升加入第五管混匀，弃去0.5毫升。如此稀释后，从第二管起，血清稀释度分别为1∶12.5，1∶25，1∶50，1∶100。然后先以0.5%碳酸生理盐水将抗原原液作20倍稀释，并加入上述各管（第一管不加，作为血清对照组），每管加0.5毫升，振摇均匀。加入血清后，第二至第五管各管混合液的容积均为1毫升，血清稀释度从第二管起依次为1∶25，1∶50，1∶100，1∶200。每次试验还应做阴性血清对照：阴性血清需取自未患过布氏杆菌病的牛，且先须以布氏杆菌抗原检定，证明确为阴性反应者。阳性血清对照：阳性血清通常取自人工免疫的牛，但亦可从送检血清中选取，其凝集价最好不低于1∶800。抗原对照：加1∶20抗原稀释液0.5毫升于试管中，再加入0.5毫升碳酸生理盐水。以上试管于充分振荡后置于37～38℃恒温箱中22～24小时，然后检查并记录结果。

判定标准：“++++”表示上层液体100%清亮，管底有极显著的伞状沉淀物。振荡时，沉淀物碎裂成花瓣状、块状和粒状（100%菌体被凝集）。“+++”表示凝集现象与四个加号相同，但上层液体75%清亮（75%菌体被凝集）。“++”表示上层液体50%清亮，管底有伞状沉淀物，振荡时碎裂成花瓣状、块状和柱状（50%菌体被凝集）。“+”表示上层液体25%清亮，管底有不很显著的伞状沉淀，或只有伞状沉淀的痕迹。振荡时，在液体中有可见小块和粒状物（25%）菌体被凝集。“-”表示无凝集现象。液体不透明，无伞状沉淀，有时细菌可能沉于管底，但振荡时又呈均匀混浊状态。牛以1∶100稀释度出现两个加号以上的凝集现象时，被检血清判定为阳性反应。以1∶50稀释度出现两个加号以上的凝集现象时，被检血清判定为可疑反应。可疑反应的牛，经过3～4周，须重新采血检验。如重检仍为可疑，应判定为阳性反应。